期刊简介
本刊是由浙江省中西医结合学会和浙江省中西医结合医院主办，由浙江省卫生厅主管的杂志，以中西医结合为主，以临床为主，面向临床、面向基层。
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- 杂志名称：浙江中西医结合杂志
- 主管单位：浙江省卫生厅
- 主办单位：浙江省中西医结合学会 浙江省中西医结合医院
- 国际刊号：1005-4561
- 国内刊号：33-1177/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中)
野生型p53基因对白血病K562细胞的增殖抑制作用
林筱洁；高瑞兰；吴超群；林圣云
关键词：K562细胞, 逆转录病毒, p53基因
摘要：目的:建立携野生型p53基因的K562细胞株,研究该细胞内野生型p53基因的表达并观察其生物学特性.方法:构建重组人p53逆转录病毒载体,导入PA317细胞中进行包装,经过病毒滴度测定,筛选高滴度的产病毒细胞克隆.收集培养上清液中的重组人p53逆转录病毒颗粒,感染K562靶细胞,建立携野生型p53基因的K562细胞株.观察该细胞株的生长方式、形态学和生长速度.SP免疫组化染色法检测p53蛋白表达.进一步用流式细胞仪检测p53蛋白表达率和细胞周期变化;双层软琼脂培养实验检测细胞的增殖潜能改变.以pBabe空载体同时实验,作为各阶段的对照.结果:成功地构建了重组逆转录病毒载体pBabe/p53;获得逆转录病毒生产PA317/p53细胞系,高病毒滴度为4.64×105CFU/ml;获稳定表达p53基因的K562/p53靶细胞,免疫组化结果证实该细胞内有野生型P53蛋白表达,流式细胞仪检测到野生型P53蛋白表达率为1.32%;与对照K562/pBabe细胞比较,K562/p53靶细胞的生长速度下降;软琼脂集落生成的下降率为27.14±4.49%(P＜0.05);增殖指数下降,S期比例下降(P均＜0.01).结论:制备了携p53基因的高滴度逆转录病毒,建立携野生型p53基因的K562/p53细胞株,证实表达的野生型p53蛋白对该细胞有抑制作用.
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