期刊简介
本刊是由浙江省中西医结合学会和浙江省中西医结合医院主办，由浙江省卫生厅主管的杂志，以中西医结合为主，以临床为主，面向临床、面向基层。
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- 杂志名称：浙江中西医结合杂志
- 主管单位：浙江省卫生厅
- 主办单位：浙江省中西医结合学会 浙江省中西医结合医院
- 国际刊号：1005-4561
- 国内刊号：33-1177/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 知网收录(中), 维普收录(中)
蛇床子素增强TNF-α对骨肉瘤细胞凋亡诱导活性及机制研究
王锦军
关键词：骨肉瘤, 蛇床子素, TNF-α, RIP1, 去泛素化, Caspase-8, 细胞凋亡
摘要：目的：观察蛇床子素增强肿瘤坏死因子对骨肉瘤细胞的凋亡能力及其机制。方法将骨肉瘤细胞系HOS分为对照组、TNF-α组及蛇床子素联合TNF-α组和蛇床子素+TNF-α+CYLD siRNA组；MTT法检测HOS细胞的细胞活力，Annexin V/PI染色检测HOS细胞的凋亡，免疫共沉淀联合Western blot法检测HOS细胞RIP1蛋白的泛素化，Western blot法检测HOS细胞caspase-8的活化和CYLD去泛素化酶的相对表达量。结果与对照组比较，TNF-α组、蛇床子素+TNF-α组对HOS细胞活力的抑制率增加[（12.5±0.9）％、（58.6±3.8）％比0，P﹤0.05]，TNF-α组、蛇床子素+TNF-α组对HOS细胞凋亡诱导率提高（8.3±0.5）％、（39.9±2.5）％比（1.9±0.3）％，P﹤0.05]，而蛇床子素+TNF-α+CYLD siRNA组的HOS细胞活力抑制率、HOS细胞凋亡诱导率均低于蛇床子素+TNF-α组[（22.1±1.2）％比（58.6±3.8）％，P﹤0.05；（13.5±0.9）％比（39.9±2.5）％，P﹤0.05]。与对照组、TNF-α组比较，蛇床子素+TNF-α组RIP1泛素蛋白相对表达量降低（0.28±0.02比1.00±0.07、0.81±0.06，P﹤0.05），蛇床子素+TNF-α组活化的caspase-8蛋白的相对表达量明显提高（0.46±0.04比0.01±0.01、0.08±0.02，P﹤0.05），蛇床子素+TNF-α组CYLD蛋白的相对表达量也明显增加（0.81±0.05比0.28±0.02、0.30±0.02，P﹤0.05）。与蛇床子素+TNF-α组比较，蛇床子素+TNF-α+CYLD siRNA组RIP1泛素蛋白相对表达量增加（0.77±0.05比0.28±0.02，P﹤0.05），显示CYLD siRNA能显著抑制蛇床子素对TNF-α的协同作用。结论蛇床子素通过上调去泛素化酶CYLD的表达水平，促进TNF-α依赖的RIP1蛋白的去泛素化，进而诱导骨肉瘤细胞caspase-8的活化和凋亡的发生。
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