Kindlin-2介导足细胞损伤在局灶节段肾小球硬化症模型小鼠发病中的作用研究

摘要：目的 探讨Kindlin-2介导足细胞损伤在局灶节段肾小球硬化症模型小鼠发病中的作用.方法 8周龄雄性BALB/C小鼠分为正常对照组和模型组,各18只.模型组小鼠注射阿霉素(ADR,浓度2mg/mL,剂量10mg/kg鼠重)造模,正常对照组小鼠给予等量的生理盐水,于第4、8、12周每组各处死6只小鼠,检测24h尿蛋白定量、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC),光镜观察肾脏组织病理学改变,免疫组织化学技术检测足细胞数量,RT-qPCR技术检测肾脏组织Kindlin-2、肾病蛋白(Nephrin)及Podocin mRNA表达水平.结果 与正常对照组比较,模型组4、8、12周24h尿蛋白定量、血总胆固醇(TC)均增加[24h尿蛋白定量:(5.66±1.06)mg/24h比(1.72±0.62)mg/24h、(4.63±1.16)mg/24h比(1.77±0.63)mg/24h、(4.78 ±0.87)mg/24h比(1.69±0.49)mg/24h;血TC:(8.84±1.30) mmol/L比(2.01 ±0.49) mmol/L、(7.45±1.27)mmol/L比(2.06±0.49)mmol/L、(6.79±1.38)mmol/L比(2.10±0.54)mmol/L,P均＜0.05];血ALB水平降低[(11.98±1.33)g/L比(22.27±1.41)g/L、(12.78±1.47)g/L比(22.65±1.49)g/L、(12.99±1.38)g/L比(23.31±1.49)g/L,P均＜0.05];模型组第4周可见部分肾小球出现局灶、节段硬化,伴有足细胞肿胀;第8周部分肾小球出现球性硬化,伴有明显的足细胞增生和肥大;第12周弥漫性肾小球出现球形硬化.模型组足细胞数量随着时间的进展逐渐减少[(77.40±7.56)个/肾小球比(104.00±10.05)个/肾小球,(63.27±8.51)个/肾小球比(103.80±12.23)个/肾小球,(53.15±8.23)个/肾小球比(98.86±8.89)个/肾小球,P均＜0.05].模型组第4周开始Kindlin-2 mRNA水平明显上调[(1.14±0.06)、(1.13±0.08)、(1.45±0.10)比(0.82±0.07),P均＜0.05],Podocin mRNA水平明显下调[(1.79±0.08)、(1.64±0.06)、(1.45±0.07)比(2.05 ±0.05),P均＜0.05],第8周开始Nephrin mRNA水平明显下调[(1.42±0.13)、(1.17±0.11)比(2.06±0.20),P均＜0.05].Kindlin-2 mRNA水平与足细胞数量(r=-0.02,P＜0.01)、Nephrin mRNA水平(r=-0.8,P＜0.01)、Podocin mRNA水平(r=-0.9,P＜0.01)呈显著负相关.结论 Kindlin-2可能通过介导足细胞损伤参与小鼠局灶节段肾小球硬化症的发病过程.